公布日：2022.02.08

申请日：2021.11.29

分类号：C12N1/20(2006.01)I;C02F3/34(2006.01)I;C05F15/00(2006.01)I;C05F17/20(2020.01)I;C12R1/38(2006.01)N;C12R1/465(2006.01)N;

C12R1/47(2006.01)N;C12R1/125(2006.01)N;C12R1/545(2006.01)N;C12R1/01(2006.01)N;C02F103/36(2006.01)N

摘要

本发明公开了一种微生物组合物及使用其处理废水的方法。一种用于处理废水的微生物组合物，所述微生物组合物包含斯氏假单胞菌、红色链霉菌、白色链霉菌、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和喜盐放线菌中的至少两种；所述废水满足以下条件的一项或两项：a.COD值达到90000‑110000mg/L；b.总氮值达到3000‑5000mg/L。本发明提供了的利用牛磺酸工业废水培养生物组合物的方法成本低廉、效果好；牛磺酸生产中的废液用来培养微生物组合物可以降低废水中的COD(最高可降解超过95％的COD)和总氮；且废水可以用做微生物组合物的培养，发酵获得的细菌可以用做生物肥，对蔬菜和绿植具有增肥效果。

权利要求书

1.一种用于处理废水的微生物组合物，其特征在于，所述微生物组合物包含斯氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)、红色链霉菌(Streptomycesruber)、白色链霉菌(Streptomycesalbus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、胶冻样芽孢杆菌(Streptomycesgriseusvar.ferrugineus)和喜盐放线菌(Haloactinomycessp.)中的至少两种，所述废水满足以下条件的一项或两项：a.COD值达到90000~110000mg/L，优选100000mg/L；b.总氮值达到3000~5000mg/L；优选4000mg/L；较佳地，所述微生物组合物包含红色链霉菌和胶冻样芽孢杆菌，或者包含红色链霉菌和喜盐放线菌，或者包含白色链霉菌和斯氏假单胞菌，或者包含红色链霉菌和枯草芽孢杆菌。

2.如权利要求1所述的微生物组合，其特征在于，所述斯氏假单胞菌在中国微生物菌种查询网的平台编号为bio~17137；和/或，所述红色链霉菌在中国微生物菌种查询网的平台编号为bio~096964；和/或，所述白色链霉菌在中国微生物菌种查询网的平台编号为bio~18862；和/或，所述枯草芽孢杆菌在中国微生物菌种查询网的平台编号为bio~62321；和/或，所述胶冻样芽孢杆菌在中国微生物菌种查询网的平台编号为bio~62177；和/或，所述喜盐放线菌在河南省工业微生物菌种工程技术研究中心的产品编号为BNCC218473。

3.一种处理废水的方法，其特征在于，所述方法包括将所述废水与如权利要求1或2所述的微生物组合物混合、培养所述微生物组合物，所述废水满足以下条件的一项或两项：a.COD值达到90000~110000mg/L，优选100000mg/L；b.总氮值达到3000~5000mg/L；优选4000mg/L。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述废水为来自牛磺酸生产中氨除盐后的废水；和/或，所述方法包括以下步骤：(1)取所述废水，稀释1~20倍；优选1~5倍；(2)接种1％~10％的所述微生物组合物进行发酵；优选2％~8％，更优选4％，其中百分比为体积百分比。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述方法满足以下条件中的一项或多项：步骤(1)中包括使用蒸发方法去除氨的步骤；步骤(2)中包括在发酵过程中补充葡萄糖的步骤；所述发酵的pH为7~9，优选为7.5；所述发酵的温度为25~30℃；所述发酵的时间为6~36h，优选为24h。

6.一种微生物发酵的方法，其特征在于，所述方法包括将废水与如权利要求1或2所述的微生物组合物混合、培养所述微生物组合物，所述废水满足以下条件的一项或两项：a.COD值达到90000~110000mg/L，优选100000mg/L；b.总氮值达到3000~5000mg/L；优选4000mg/L。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述废水为来自牛磺酸生产中氨除盐后的废水；和/或，所述方法包括以下步骤：(1)取废水，稀释1~20倍；优选1~5倍；(2)接种1％~10％的所述微生物组合物进行发酵；优选2％~8％，更优选4％，其中百分比为体积百分比。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法满足以下条件中的一项或多项：步骤(1)中包括使用蒸发方法去除氨的步骤；步骤(2)中包括在发酵过程中补充葡萄糖的步骤；所述发酵的pH为7~9，优选为7.5；所述发酵的温度为25~30℃；所述发酵的时间为6~36h，优选为24h。

9.一种生物肥料的制备方法，其包括如下步骤：(1)使用如权利要求6~8任一项所述的方法进行发酵；(2)完成所述发酵后去除发酵液获得菌体；较佳地，所述制备方法还包括将所述菌体进行堆肥处理；更佳地，所述堆肥在小麦秸秆中进行。

10.一种生物肥料，其通过如权利要求9所述的制备方法获得；较佳地，所述植物为蔬菜或绿植；其中，所述蔬菜优选冬瓜、南瓜或西红柿，所述绿植优选绿萝。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种微生物组合物及使用其处理废水的方法。本发明提供的利用牛磺酸工业废水培养生物组合物的方法，成本低廉、效果好；牛磺酸生产中的废液用来培养微生物组合物可以降低废水中的COD(最高可降解超过95％的COD)和总氮；且废水可以用做微生物组合物的培养(组合物可以在COD值超过100000mg/L的环境下存活)，发酵获得的细菌可以用做生物肥，对蔬菜和绿植具有增肥效果。

本发明第一方面提供一种用于处理废水的微生物组合物，所述微生物组合物包含斯氏假单胞菌(Pseudomonasstutzeri)、红色链霉菌(Streptomycesruber)、白色链霉菌(Streptomycesalbus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、胶冻样芽孢杆菌(Streptomycesgriseusvar.ferrugineus)和喜盐放线菌(Haloactinomycessp.)中的至少两种，所述废水满足以下条件的一项或两项：

a.COD值达到90000~110000mg/L；

b.总氮值达到3000~5000mg/L。

其中，所述COD值优选100000mg/L。

其中，所述总氮值优选4000mg/L。

所述斯氏假单胞菌优选在中国微生物菌种查询网平台编号为bio~17137的斯氏假单胞菌。

所述红色链霉菌优选在中国微生物菌种查询网平台编号为bio~096964的红色链霉菌。

所述白色链霉菌优选在中国微生物菌种查询网平台编号为bio~18862的白色链霉菌。

所述枯草芽孢杆菌优选在中国微生物菌种查询网平台编号为bio~62321的枯草芽孢杆菌。

所述胶冻样芽孢杆菌优选在中国微生物菌种查询网平台编号为bio~62177的胶冻样芽孢杆菌。

所述喜盐放线菌优选在河南省工业微生物菌种工程技术研究中心产品编号为BNCC218473的喜盐放线菌。

在某一较佳实施方案中，所述微生物组合物包含红色链霉菌和胶冻样芽孢杆菌、或者包含红色链霉菌和喜盐放线菌、或者包含白色链霉菌和斯氏假单胞菌、或者包含红色链霉菌和枯草芽孢杆菌。

本发明第二方面提供一种处理废水的方法，所述方法包括将所述废水与如本发明第一方面所述的微生物组合物混合、培养所述微生物组合物，所述废水满足以下条件的一项或两项：

a.COD值达到90000~110000mg/L；

b.总氮值达到3000~5000mg/L。

其中，所述COD值优选100000mg/L。

其中，所述总氮值优选4000mg/L。

在某一较佳实施方案中，所述废水为来自牛磺酸生产中氨除盐后的废水。

所述方法较佳地包括以下步骤：

(1)取所述废水，稀释1~20倍；优选1~5倍；

(2)接种1％~10％的微生物进行发酵；优选2％~8％，更优选4％，百分比为体积百分比。

所述稀释可为本领域常规，比如使用水进行稀释。

在某一较佳实施方案中，步骤(1)中包括使用蒸发方法去除氨的步骤。

所述方法中，步骤(2)中较佳地包括在发酵过程中补充葡萄糖的步骤。

所述方法中，所述发酵的pH较佳地为7~9，更佳地为7.5。

所述方法中，所述发酵的温度较佳地为25~30℃。

所述方法中，所述发酵的时间较佳地为6~36h，更佳地为24h。

本发明第三方面提供一种微生物发酵的方法，所述方法包括将废水与如本发明第一方面所述的微生物组合物混合、培养所述微生物组合物，所述废水满足以下条件的一项或两项：

a.COD值达到90000~110000mg/L；

b.总氮值达到3000~5000mg/L。

其中，所述COD值优选100000mg/L。

其中，所述总氮值优选4000mg/L。

在某一较佳实施方案中，所述废水为来自牛磺酸生产中氨除盐后的废水。

所述方法较佳地包括以下步骤：

(1)取所述废水，稀释1~20倍；优选1~5倍；

(2)接种1％~10％的微生物进行发酵；优选2％~8％，更优选4％，百分比为体积百分比。

所述稀释可为本领域常规，比如使用水进行稀释。

在某一较佳实施方案中，步骤(1)中包括使用蒸发方法去除氨的步骤。

所述方法中，步骤(2)中较佳地包括在发酵过程中补充葡萄糖的步骤。

所述方法中，所述发酵的pH较佳地为7~9，更佳地为7.5。

所述方法中，所述发酵的温度较佳地为25~30℃。

所述方法中，所述发酵的时间较佳地为6~36h，更佳地为24h。

本发明第四方面提供一种生物肥料的制备方法，其包括如下步骤：

(1)使用如本发明第三方面所述的方法进行发酵；

(2)完成所述发酵后去除发酵液获得菌体；

所述生物废料的制备方法中，较佳地还包括将所述菌体进行堆肥处理。

所述堆肥较佳地在小麦秸秆中进行。

本发明第五方面提供一种生物肥料，其通过如本发明第四方面所述的制备方法获得。

本发明第六方面提供一种如本发明第五方面所述的生物肥料在植物培养中的应用。

所述应用中，所述植物较佳地为蔬菜或绿植，例如冬瓜、南瓜或西红柿、或绿萝。

在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的技术原理和机理解释：

1、牛磺酸生产废液中含有高COD物质和氨氮物质，COD可作为益生菌的碳源，氨氮可作为益生菌的氮源；

2、作为土壤的活跃组成分,土壤微生物的区系组成、生物量及其生命活动对土壤的形成和发育有密切关系。例如有些土壤微生物可以形成土壤结构、有些可以分解矿物质、有些还可以固定空气中的氮等。

本发明所述的斯氏假单胞菌、红色链霉菌、白色链霉菌、枯草芽孢杆菌、胶冻样芽孢杆菌和喜盐放线菌可在中国农业微生物菌种保藏中心、中国菌种保藏中心ATCC、中国工业微生物菌种保藏中心CICC、或中国普通微生物菌种保藏管理中心CGMCC、河南省工业微生物菌种工程技术研究中心获得，也可用常规的方法，从污水站附近的土壤中提取。

例如，枯草芽孢杆菌的提取方法为：(1)在牛磺酸污水站排水口处(或其他氨基酸的废水排放口)采取土样，将土样均匀的分散的无菌水中；(2)取步骤(1)悬液中的上清液，稀释，涂布到无菌土壤浸出汁制成的基本培养基的平板上，37℃培养箱中倒置培养24~48小时4分离；(3)用选择培养基筛选相应的枯草芽孢杆菌，也可培养后水浴加热至80度维持20min，然后涂布，由于枯草芽孢杆菌形成芽孢后耐热，能存活下来，涂平板后挑单菌落做镜检；(4)将筛选出的枯草芽孢杆菌接种到适合其生长的液体培养基，使其大量繁殖。

筛选红色链霉菌的方法为：(1)在适合红色链霉菌生长的地方采取土样，优选为在牛磺酸污水站排水口处(或其他氨基酸的废水排放口)，将土样均匀的分散的无菌水中；(2)取上述悬液中的上清液，稀释，涂布到无菌土壤浸出汁制成的基本培养基的平板上，37℃培养箱中倒置培养24~48小时；(3)用选择培养基(ISP2培养基、TSBY培养基)筛选相应的红色链霉菌；(4)将筛选出的红色链霉菌接种到适合其生长的液体培养基，使其大量繁殖。

本发明的积极进步效果在于：

本发明提供了的利用牛磺酸或氨基酸工业废水培养生物组合物的方法，成本低廉、效果好；牛磺酸生产中的废液(或氨基酸生产中的废液)用来培养微生物组合物可以降低废水中的COD(组合物可以在COD值超过100000mg/L的环境下存活，并且最高可降解超过95％的COD)和总氮；且废水可以用做微生物组合物的培养，发酵获得的细菌可以用做生物肥，对蔬菜和绿植具有增肥效果。

（发明人：孙华君;江汝泳;郭晨;赵威;熊舒婷;钱志强）